酸奶中有機酸檢測的固相萃取方法-SAX固相萃取柱

酸奶是以牛奶為原料，經發酵之后的一種牛奶制品。有機酸是酸乳中的重要因素，具有抑菌、抗病毒等作用。有機酸不僅是酸乳發酵的重要指標，也是酸乳的主要風味和營養物質之一和天然防腐劑，其含量高低于酸乳的品質有密切關系。

《GB5009.157-2016食品中有機酸的測定》規定了食品中酒石酸、乳酸、檸檬酸等七種有機酸的檢測方法。有機酸是目前食品領域內采用的比較普遍的酸味劑，可以提高食品的風味，食品中一部分的有機酸是食品中固有的或者是工藝中形成的，但是仍然有一部分有機酸是人為添加的，因此檢測食品中的有機酸的含量是很有必要的。

根據《GB5009.157-2016食品中有機酸的測定》，利用SAX固相萃取柱作為酸奶中有機酸檢測的樣品前處理方法，HPLC法為檢測手段，開發出酸奶中有機酸的測試方法。

樣品前處理：

準確移取酸奶5.0 g于50 mL離心管中加入水至50 mL渦旋1 min分散均勻。4500 r / min離心10 min。取上清液10 mL，備用。

SPE柱凈化：

1.活化：SAX固相萃取柱使用前用6 mL甲醇、6 mL 水活化；
2.上樣：往固相萃取柱中加入提取備用液5 mL，棄去流出液；
3.淋洗：在SPE柱上加入3 mL水淋洗，棄去淋洗液；
4.洗脫：用2mL 6%鹽酸水溶液洗脫，收集洗脫液（整個上樣淋洗洗脫過程中流速保持  <1 mL/min）；
5.洗脫液定容至2 mL，0.22 μm濾膜過濾，濾液上機測試。
HPLC條件：

設備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)
檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器
流動相： A：甲醇   B：0.025 mol/L磷酸二氫鉀（PH：2.5）
等度洗脫 ： A： B=5：95
流速：1.0 mL/min
檢測波長：214 nm
進樣體積:20 μL