用于辣椒粉中蘇丹紅檢測的分子印跡固相萃取方法 （分子印跡專用柱)

蘇丹紅又名蘇丹(Sudan)，是一種化工染色劑，主要用于油彩、機油、蠟和鞋油等產品的染色。用蘇丹紅染色后的食品顏色鮮艷且不易褪色，能夠引起人們強烈的食欲，所以很多不法商販將蘇丹紅添加到食品當中。

蘇丹紅被國際癌癥研究機構(IARC)劃分為潛在遺傳毒性物質和致癌物質，它們的降解產物也被認為具有致癌性。因此，歐盟(EU)委員會決議強制要求對辣椒粉以及含有辣椒粉的產品進行蘇丹紅檢測，包括蘇丹紅 I 號、 II 號、 III 號和 IV號 。

實驗部分

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測辣椒粉中蘇丹紅的含量。該方法可簡化樣品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物;

蘇丹紅I(CAS:842-07-9)、蘇丹紅II(CAS:3118-97-6)、蘇丹紅III(CAS:85-86-9)、蘇丹紅IV(CAS:85-83-6)

三、適用范圍

本方法適用于辣椒粉中蘇丹紅檢測的HPLC檢測及確證。

四、實驗材料

蘇丹紅分子印跡專用柱

五、實驗方法

1、樣品提取

準確稱取辣椒粉0.5 g于15 mL離心管中，加入5 mL正己烷，渦旋混合1 min，超聲5 min，3000 r/min離心5min，取上清液；上述步驟重復提取4次，合并所有上清液，于40 ℃下氮吹濃縮至約4 mL，待凈化。

2、SPE凈化

(1)活化：蘇丹紅固相萃取柱使用前用5 mL正己烷活化。

(2)上樣和洗脫：往固相萃取柱中加入待凈化液；再加入5 mL正己烷淋洗，棄去流出液，再加5 mL乙酸乙酯進行洗脫，收洗脫液。

(3)重新溶解：洗脫液40℃氮吹近干，1 mL乙腈定容，渦旋1 min，經濾膜過濾供HPLC測試。

3、HPLC條件

設備：Waters Alliance 2695

色譜柱：CommaSep® ODS  (4.6 mm×150 mm, 5 μm)

檢測器：Waters 2487 紫外檢測器

波長：478 nm

梯度洗脫：A：乙腈  B：0.1 %甲酸水溶液

六、實驗結果

1、5 .0 mg/kg辣椒粉中蘇丹紅的添加回收結果

2、添加水平為5.0 mg/kg蘇丹紅標準液相色譜圖

圖1  添加水平為 5.0 mg/kg蘇丹紅標準液相色譜圖