牛奶中五氯酚殘留量檢測的固相萃取方法 (MAX)
一、實驗?zāi)康?/h3>
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測牛奶中五氯酚殘留量的含量。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗?zāi)繕?biāo)物
五氯酚鈉
三、參考標(biāo)準(zhǔn)
《GB 23200.92-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物源性食品中五氯酚殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜法》
四、實驗材料
MAX 60mg/3ml
五、實驗方法
1、樣品提取
準(zhǔn)確稱取牛奶樣品2.0 g，加入10 mL 5%三乙胺的乙腈-水（7:3,v/v）溶液，渦旋混合1 min，超聲提取5 min，5000 r/min離心5 min，取上清液待凈化。
2、SPE凈化
(1)活化：固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇、5 mL 水活化。
(2)上樣和洗脫：往固相萃取柱中加入待凈化液；依次加入5 mL 5%氨水溶液、5mL甲醇、5mL 2%甲酸的甲醇-水（取4%甲酸甲醇溶液與水等體積混勻）溶液淋洗，棄去流出液；抽干小柱，再加入4 mL 4%甲酸甲醇溶液洗脫，收洗脫液。
(3)重新溶解：洗脫液與40℃氮吹至近干，用1 mL流動相定容，混勻，過0.45um有機(jī)微濾膜，供HPLC測試。
3、HPLC條件
設(shè)備：Waters Alliance 2695
色譜柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5μm)
檢測器：Waters 2996 DAD檢測器
檢測波長：300 nm
流動相：A：乙腈 B：0.1%磷酸水
洗脫方式：等度洗脫，A:B=75:25
流速：1.0 mL/min
進(jìn)樣體積：20 μL
六、實驗結(jié)果
1、 0.5 mg/kg牛奶中五氯酚的添加回收結(jié)果
表1 0.5 mg/kg牛奶中五氯酚的添加回收結(jié)果
2、 添加水平為 0.5 mg/kg牛奶中五氯酚檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為 0.5 mg/kg牛奶中五氯酚檢測的液相色譜圖
