228多功能固相凈化柱
發布時間：2022/02/10
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參考標準
?GB 5009.185-2016 食品安全國家標準 食品中展青霉素的測定
試劑配制
?乙酸溶液:取10mL乙酸加入250mL水,混勻。
?果膠酶(液體):活性 ≥1500U / g , 2℃~8℃ 避光保存。(P/N: Clover 228-01)
樣品提取
?液體試樣(蘋果汁、山楂汁等)
稱取4g試樣(準確至0.01g)于50mL離心管中,加入21mL乙腈,混合均勻,在6000r/min下離心5min,待凈化。
?固體、半流體試樣(山楂片、果丹皮、蘋果果泥、蘋果果醬、帶果粒果汁等)
稱取1g試樣(準確至0.01g)于50mL離心管中,再加入10mL水與150μL果膠酶溶液混勻,室溫下避光放置過夜后,加入10.0mL乙酸乙酯,渦旋 混合5min,在6000r/min下離心5min,移取乙酸乙酯層至梨形燒瓶。再用10.0mL乙酸乙酯提取一次,合并兩次乙酸乙酯提取液,在40℃水浴中用旋轉蒸發儀濃縮至干,以2.0mL乙酸溶液溶解殘留物, 再加入8mL乙腈,混勻后待凈化。
樣品凈化
將提取液通過凈化柱凈化,棄去初始的1mL凈化液,收集后續部分。用吸量管準確吸取5.0mL凈化液,加入20μL乙酸,在40℃下用氮氣緩緩地吹至近干,加入乙酸溶液定容至1mL,渦旋30s溶解殘渣,過0.22μm 濾膜,收集濾液于進樣瓶中以備進樣。
液相色譜條件
?色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）
?流動相：乙腈-水（5+95，v/v）或甲醇-水（10+90，v/v）
?流速：0.8mL/min
?檢測器：紫外檢測器，波長276nm
?進樣體積：20~100uL
?柱溫：40℃
?色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）
?流動相：乙腈-水（5+95，v/v）或甲醇-水（10+90，v/v）
?流速：0.8mL/min
?檢測器：紫外檢測器，波長276nm
?進樣體積：20~100uL
?柱溫：40℃
